पीसीआर प्रयोगों के दौरान संदूषण के 4 कारण

नए कोरोनावायरस के प्रकोप के कारण, विभिन्न स्थानों पर पीसीआर जीन प्रवर्धन प्रयोगशालाओं के निर्माण में धीरे-धीरे तेजी आई है। नए कोरोनरी निमोनिया के निदान के लिए वायरल न्यूक्लिक एसिड का पता लगाना एक महत्वपूर्ण मानक है। पीसीआर प्रयोगशाला, जिसे जीन प्रवर्धन प्रयोगशाला के रूप में भी जाना जाता है, आणविक जीव विज्ञान प्रौद्योगिकी को अपनाती है। न्यूक्लिक एसिड के टुकड़ों को बढ़ाकर, इसे विट्रो में एक विशेष न्यूक्लिक एसिड प्रतिकृति के रूप में भी माना जा सकता है। मानव शरीर में वायरस सामग्री को समझने के लिए जीन ट्रैकिंग सिस्टम का उपयोग किया जाता है, और पता लगाने की सटीकता नैनोमीटर स्तर तक पहुंच सकती है। नए कोरोनावायरस न्यूक्लिक एसिड का पता लगाना भी प्रौद्योगिकी की इस श्रेणी से संबंधित है और नए कोरोनरी निमोनिया के निदान के लिए एक महत्वपूर्ण मानक है।

पीसीआर जीन प्रवर्धन प्रयोगशाला मुख्य रूप से डिटेक्शन न्यूक्लिक एसिड टेम्प्लेट को बढ़ाती है। यह देखा जा सकता है कि प्रयोगशाला में क्रॉस-संदूषण होने की सबसे अधिक संभावना है, जिसके परिणामस्वरूप परीक्षण नमूनों में गलत सकारात्मक परिणाम मिलते हैं। इसलिए, पीसीआर प्रयोगशालाओं में सख्त डिजाइन आवश्यकताएं और मानक हैं।

अब पीसीआर तकनीक का व्यापक रूप से संक्रामक रोगों, ट्यूमर लक्ष्यीकरण, प्रजनन आनुवंशिकी आदि के क्षेत्रों में उपयोग किया जा रहा है। हालांकि, इस तकनीक द्वारा परीक्षण किए जाने वाले न्यूक्लिक एसिड के कई और बड़े प्रवर्धन के कारण, बहुत कम मात्रा में संदूषण भी हो सकता है। आसानी से दूसरा, पीसीआर तक ले जाएं तकनीकी आवश्यकताएं अपेक्षाकृत अधिक हैं, और प्रयोगात्मक प्रक्रिया जटिल है। यदि मध्यवर्ती कड़ियों में चूक होती है, तो गलत नकारात्मक परिणाम हो सकते हैं।

1. यह पीसीआर प्रवर्धन उत्पादों का संदूषण है। यह प्रदूषण का सबसे आम कारण भी है। पीसीआर उत्पादों के बार-बार प्रवर्धन के बाद, प्रतिकृति की मात्रा पीसीआर की पहचान सीमा से कहीं अधिक है, इसलिए बहुत कम मात्रा में संदूषण भी प्रयोगात्मक परिणामों में झूठी सकारात्मकता पैदा करने के लिए पर्याप्त है।

2. अभिकर्मक संदूषण। अभिकर्मक की तैयारी के दौरान, दूषित कंटेनरों, पिपेट, पिपेट युक्तियों, समाधानों आदि के संपर्क में आने से अभिकर्मकों का संदूषण हो सकता है।

3. परीक्षण किया जाने वाला नमूना दूषित है। जिस कंटेनर में नमूना रखा गया है वह दूषित है या कंटेनर की खराब सीलिंग के कारण नमूना दूषित है; दूसरे, न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण प्रक्रिया के दौरान दूषित पिपेट या पिपेट युक्तियों के उपयोग से नमूने का संदूषण हो जाएगा; इसके अलावा, कुछ नमूनों में वायरस होते हैं, यदि हवा में फैल जाते हैं, तो क्रॉस-संदूषण हो सकता है।

4. एरोसोल प्रदूषण। यदि एरोसोल में वायरस और अन्य प्रदूषक होते हैं और हवा में फैल जाते हैं, तो इससे पीसीआर उत्पाद के दूषित होने की बहुत संभावना है। एरोसोल हवा और तरल की सतह के बीच घर्षण से बनते हैं। ढक्कन खोलना, रिएक्शन ट्यूब को हिलाना, और बार-बार संदूषण सैंपलर को एस्पिरेट करना एरोसोल बना सकता है जिससे क्रॉस-संदूषण हो सकता है। गणना के बाद, एक एरोसोल कण में 48,000 भाग हो सकते हैं, इसलिए एरोसोल से होने वाले प्रदूषण पर विशेष ध्यान देना चाहिए। जब तक पीसीआर प्रयोगशाला दूषित है, पिछली परिणाम रिपोर्ट अमान्य है और अन्य प्रयोगात्मक संचालन नहीं किया जा सकता है। सटीक और प्रभावी प्रयोगात्मक परिणाम प्राप्त करने के लिए संदूषण के स्रोत की पहचान की जानी चाहिए और उसे पूरी तरह से हटा दिया जाना चाहिए।