सीरम बोतल के आवेदन

सीरम की बोतल का अनुप्रयोग

सीरम बोतल कम निष्कर्षण बोरोसिलिकेट ग्लास से बना है, और रंगहीन स्पष्ट बोतल यूएसपी टाइप I और एएसटीएम ई 438 टाइप I मानक वर्ग ए की आवश्यकताओं को पूरा करती है। इसे 20min के लिए 121 °C पर autoclaved किया जा सकता है, और मात्रा के अनुसार 125ml, 250ml, 500ml, 1L, 2L में विभाजित किया जा सकता है।

सीरम बोतल सीरम के भंडारण के लिए एक कंटेनर है, जो आमतौर पर इंजेक्शन खिंचाव उड़ाने की प्रक्रिया द्वारा पीईटी सामग्री से बना होता है। माध्यम कोशिका वृद्धि के लिए आवश्यक पोषक तत्व है। इसके स्रोत के अनुसार, इसे सिंथेटिक माध्यम और प्राकृतिक माध्यम में विभाजित किया गया है, दोनों को सीरम बोतलों में संग्रहीत किया जा सकता है।

सीरम की बोतल

प्राकृतिक माध्यम:

सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला प्राकृतिक माध्यम सीरम है, मूल रूप से बछड़ा सीरम। सीरम में विभिन्न प्रकार के सेल विकास कारक, आसंजन को बढ़ावा देने वाले कारक और उनके बहु-सक्रिय पदार्थ होते हैं। सिंथेटिक माध्यम के साथ संयुक्त, कोशिकाएं फैल सकती हैं और सुचारू रूप से बढ़ सकती हैं। सीरम को -5 डिग्री सेल्सियस से -20 डिग्री सेल्सियस पर विशेष सीरम बोतलों में संग्रहीत करने की आवश्यकता होती है।

सिंथेटिक माध्यम:

सिंथेटिक माध्यम को कोशिकाओं द्वारा आवश्यक पदार्थों के प्रकार और मात्रा के अनुसार सख्ती से तैयार किया जाता है। कई प्रकार और ज्ञात घटक हैं, जो प्रयोगात्मक स्थितियों के नियंत्रण की सुविधा प्रदान करते हैं। इसमें कार्बोहाइड्रेट, अमीनो एसिड, लिपिड, अकार्बनिक लवण, विटामिन, ट्रेस तत्व और सेल विकास कारक शामिल हैं। हालांकि, प्राकृतिक माध्यम की तुलना में, कुछ प्राकृतिक अज्ञात घटकों को ज्ञात रासायनिक घटकों द्वारा प्रतिस्थापित नहीं किया जा सकता है। इसलिए, सेल संस्कृति में उपयोग किए जाने वाले बुनियादी सिंथेटिक माध्यम को सिंथेटिक संस्कृति को दूर करने के लिए प्राकृतिक माध्यम घटकों की एक निश्चित मात्रा भी जोड़नी चाहिए। अपर्याप्त आधार, सबसे आम अभ्यास बछड़े के सीरम को जोड़ना है।

सीरम बोतल का आकार वर्ग है, समझने में आसान है, अधिकांश एसिड और क्षार संक्षारण के लिए प्रतिरोधी है, भंगुरता तापमान -70 डिग्री सेल्सियस है, और इसमें अभी भी -30 डिग्री सेल्सियस पर एक निश्चित क्रूरता है। यह एक अच्छा पैकेजिंग कंटेनर है, चाहे वह प्राकृतिक माध्यम हो या सिंथेटिक संस्कृति। सीरम की बोतलों में संग्रहीत किया जा सकता है।

अलगाव के लिए, संस्कृति और मानव गर्भनाल रक्त एंडोथेलियल पूर्वज कोशिकाओं की पहचान और बेहतर फ्रीज-thaw विधि द्वारा acellular संवहनी scaffolds की स्थापना

मानव गर्भनाल रक्त से अलग और सुसंस्कृत एंडोथेलियल पूर्वज कोशिकाओं की व्यवहार्यता और नैदानिक अनुप्रयोग मूल्य का पता लगाने के लिए।

विधियाँ: प्रसूति और स्त्री रोग विभाग में पूर्णकालिक सीज़ेरियन सेक्शन से गुजरने वाले भ्रूणों के गर्भनाल रक्त, बेंगबू मेडिकल कॉलेज के पहले संबद्ध अस्पताल को एकत्र किया गया था, एक सीरम बोतल में रखा गया था जिसमें एसेप्टिक परिस्थितियों में 50U / ml हेपरिन होता है, 4 डिग्री सेल्सियस बर्फ बॉक्स में संग्रहीत किया जाता है, और कोशिकाओं में ले जाया जाता है संस्कृति कक्ष में, गर्भनाल रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं को घनत्व ग्रेडिएंट सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा प्राप्त किया गया था। प्राप्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं को दो भागों में विभाजित किया गया था, और भ्रूण के बछड़े के सीरम M199 माध्यम (FCS-M199) और ऑटोलॉगस सीरम M199 माध्यम (AS-M199) को जोड़ा गया था। और उन्हें मानव फाइब्रोनेक्टिन (एचएफएन) के साथ और बिना संस्कृति व्यंजनों में बीज दिया गया था (क्रमशः एफ (0), एफ (1), ए (0), ए (1)) के रूप में चिह्नित किया गया था। इन विट्रो प्रेरण, विभेदन और विस्तार किया गया था।

पूरे प्रेरण और भेदभाव प्रक्रिया के दौरान अनुयायी कोशिकाओं के रूपात्मक परिवर्तन देखे गए थे, और उन्हें संबंधित तकनीकों जैसे कि इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री, इम्यूनोफ्लोरेसेंस और फ्लो साइटोमेट्री के साथ संयुक्त विभिन्न कोणों से पहचाना गया था।

परिणाम: संस्कृति के 12 दिनों के बाद, गर्भनाल रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं ने पालन करना शुरू कर दिया। 3 डी के बाद, स्पिंडल आकार दिखाई देने लगा, और फिर अनुयायी कोशिकाओं की संख्या धीरे-धीरे बढ़ी और धीरे-धीरे स्पिंडल के आकार की हो गई। जब एक सप्ताह तक सुसंस्कृत किया जाता है, तो केंद्र में चारों ओर स्पिंडल कोशिकाओं और गोल कोशिकाओं के साथ एक विशिष्ट कॉलोनी का गठन होता है। जब कोशिकाओं को 14 दिनों के लिए सुसंस्कृत किया गया था, तो परस्पर जुड़े सेल क्लस्टर धीरे-धीरे जुड़े हुए थे और एक नेटवर्क जैसी संरचना का गठन किया था। उसी समय, संस्कृति के समय की निरंतर वृद्धि के साथ, लंबी धुरी कोशिकाओं ने भी धीरे-धीरे छोटा करना शुरू कर दिया, और एक ठेठ फ़र्श पत्थर की तरह परिवर्तन दिखाया।

अनुयायी कोशिकाओं को एक सप्ताह के लिए सुसंस्कृत किया गया था और यह देखा गया था कि मानव फाइब्रोनेक्टिन के साथ माध्यम में कोशिकाओं की संख्या मानव फाइब्रोनेक्टिन के बिना काफी अधिक थी, और दो अलग-अलग माध्यमों में कोशिकाओं की संख्या में कोई महत्वपूर्ण बदलाव नहीं हुआ था।