वायरल संक्रमण से होने वाली बीमारियों के लिए, इलाज किए जाने वाले वायरस के प्रकारों को स्पष्ट करने के लिए, निम्नलिखित दो प्रकार के निरीक्षण किए जा सकते हैं:
1. स्वयं वायरस का प्रत्यक्ष पता लगाना
2. यह वायरस की सतह पर मौजूद एंटीजन और वायरस के न्यूक्लिक एसिड का पता लगा सकता है।
परीक्षण ने वायरस का विरोध करने के लिए उत्पादित एंटीबॉडी की पहचान की:
सामान्य परिस्थितियों में, एंटीजन परीक्षण के लिए उच्च प्रयोगशाला स्थितियों की आवश्यकता नहीं होती है, और प्राथमिक अस्पतालों में बड़े पैमाने पर स्क्रीनिंग के लिए मुख्य रूप से उपयुक्त है; एंटीबॉडी परीक्षण संचालित करना आसान है, और परीक्षण के परिणाम 10-15 मिनट में प्राप्त किए जा सकते हैं। न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने के लिए कई प्रयोगशाला स्थितियों, रुक-रुक कर काम करने वाले कर्मियों और उपकरणों की आवश्यकता होती है, लेकिन परिणाम पृष्ठ सबसे संवेदनशील और सटीक होता है।
स्वीकृत किए गए 10 नए कोरोनावायरस न्यूक्लिक एसिड डिटेक्शन अभिकर्मकों में से, उनमें से 8 सभी फ्लोरोसेंट पीसीआर विधि का उपयोग करते हैं, और शेष पता लगाने के तरीके संयुक्त जांच-एंकर पोलीमराइज़ेशन अनुक्रमण विधि और निरंतर तापमान प्रवर्धन चिप विधि हैं।
1. प्रतिदीप्ति पीसीआर विधि
पीसीआर विधि पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन को संदर्भित करती है, जो डीएनए की ट्रेस मात्रा को बहुत बढ़ा सकती है। जब नए कोरोनावायरस का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, क्योंकि नया कोरोनावायरस एक आरएनए वायरस है, तो पीसीआर का पता लगाने से पहले वायरल आरएनए को डीएनए में उलट देना आवश्यक है।
फ्लोरोसेंट पीसीआर डिटेक्शन का सिद्धांत यह है कि जैसे-जैसे पीसीआर आगे बढ़ता है, प्रतिक्रिया उत्पाद जमा होते रहते हैं, और फ्लोरेसेंस सिग्नल की तीव्रता भी अनुपात में बढ़ जाती है। अंत में, उत्पाद की मात्रा में परिवर्तन की निगरानी प्रतिदीप्ति तीव्रता में परिवर्तन द्वारा की जाती है, जिससे एक प्रतिदीप्ति प्रवर्धन वक्र प्राप्त होता है।
यह वर्तमान में नए कोरोनावायरस के न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला तरीका है। हालाँकि, निम्नलिखित कारक परीक्षा परिणामों में त्रुटियाँ पैदा कर सकते हैं:
अनुचित भंडारण या परीक्षण के लिए प्रस्तुत करने में विफलता: आरएनए वायरस आसानी से नष्ट हो जाते हैं। इसलिए, रोगी के नमूने प्राप्त करने के बाद, उन्हें मानकीकृत तरीके से संग्रहीत करने और जल्द से जल्द परीक्षण करने की आवश्यकता होती है। अन्यथा, परीक्षा परिणाम गलत होने की संभावना है।
परिणामों की त्रुटि व्याख्या: वर्तमान में स्वीकृत परीक्षण उत्पादों का चयन नोवेल कोरोनावायरस जीनोम के ओपन रीडिंग फ्रेम 1a/b, लिफाफा प्रोटीन और न्यूक्लियोकैप्सिड प्रोटीन के आधार पर किया जाता है। हालाँकि, विभिन्न उत्पादों के डिटेक्शन प्राइमर और प्रोब डिज़ाइन अलग-अलग होते हैं, और सिंगल-टारगेट सेगमेंट, डुअल-टारगेट सेगमेंट और थ्री-टारगेट सेगमेंट की पहचान और व्याख्या में अंतर होता है। इसलिए, यदि व्याख्या को विभिन्न निर्देशों के अनुसार सख्ती से नहीं किया जाता है, तो इससे परिणाम का गलत निर्णय हो सकता है।
2. संयुक्त जांच-लंगर बहुलकीकरण अनुक्रमण विधि
यह पता लगाने के लिए मुख्य रूप से अनुक्रमण स्लाइड पर डीएनए नैनोस्फीयर द्वारा किए गए जीन अनुक्रम का पता लगाने के लिए एक विशेष उपकरण का उपयोग करना है।
इस तरह की पहचान में उच्च संवेदनशीलता होती है और निदान को याद करना आसान नहीं होता है, लेकिन परिणाम भी कई कारकों से आसानी से प्रभावित होते हैं, जिनमें शामिल हैं:
समय पर परीक्षण नहीं किए गए नमूने: फ्लोरोसेंट पीसीआर पद्धति की तरह, परिणाम गलत हो सकते हैं यदि उन्हें मानकीकृत तरीके से संग्रहीत नहीं किया जाता है और जितनी जल्दी हो सके परीक्षण किया जाता है।
परीक्षण स्थल के कमरे का तापमान बहुत अधिक है: यह परीक्षण के परिणामों की सटीकता को भी प्रभावित करेगा। विभिन्न परीक्षण उपकरण और किट भी परिणामों को प्रभावित कर सकते हैं।
3. लगातार तापमान प्रवर्धन चिप विधि
जीन चिप का पता लगाना पारंपरिक वायरोलॉजिकल डायग्नोस्टिक विधियों में से एक है। पता लगाने का सिद्धांत न्यूक्लिक एसिड की पूरक बाध्यकारी विशेषताओं के आधार पर विकसित एक पता लगाने की विधि है, जिसका उपयोग जीवों में मौजूद न्यूक्लिक एसिड को गुणात्मक या मात्रात्मक रूप से मापने के लिए किया जा सकता है। पीसीआर की तुलना में, जीन चिप में उच्च सटीकता दर और कम समय होता है, लेकिन यह अधिक महंगा भी होता है और डिटेक्शन थ्रूपुट (डेटा की मात्रा जो प्रति यूनिट समय पर उत्पन्न की जा सकती है) अपेक्षाकृत कम होती है।
इस बार स्वीकृत थर्मोस्टेट चिप नए कोरोनावायरस सहित छह प्रकार के श्वसन वायरस का पता लगा सकती है। परिणाम 1.5 घंटे के भीतर प्राप्त किया जा सकता है,
पीसीआर की तुलना में, जीन चिप में उच्च सटीकता दर और कम समय होता है, लेकिन कीमत अधिक महंगी होती है, और डिटेक्शन थ्रूपुट (प्रति यूनिट समय में उत्पन्न होने वाले डेटा की मात्रा) अपेक्षाकृत कम होती है।
4. वायरस एंटीबॉडी का पता लगाना
एंटीबॉडी का पता लगाने वाले अभिकर्मकों का उपयोग मानव शरीर द्वारा उत्पादित IgM या IgG एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए किया जाता है, जब वायरस मानव शरीर में प्रवेश करता है। IgM एंटीबॉडी पहले दिखाई देते हैं और IgG एंटीबॉडी बाद में दिखाई देते हैं।
वर्तमान में, स्वीकृत किए गए पांच नए कोरोनावायरस एंटीबॉडी डिटेक्शन अभिकर्मक कोलाइडल गोल्ड विधि और चुंबकीय कण केमिलुमिनेसिसेंस विधि का उपयोग करते हैं।
5. कोलाइडल सोना विधि
कोलाइडल गोल्ड विधि परीक्षण के लिए कोलाइडल गोल्ड टेस्ट पेपर का उपयोग करती है, जो कि वर्तमान में अक्सर संदर्भित त्वरित परीक्षण पेपर है।
इस प्रकार का परीक्षण पत्र विशेष रूप से अंकित होता है और उस पर छेद होते हैं, जिसका उपयोग परीक्षार्थी के सीरम नमूने को टपकाने के लिए किया जाता है। कोलाइडल गोल्ड टेस्ट पेपर पर दो लाइन होती हैं, एक को टेस्ट लाइन और दूसरी को क्वालिटी कंट्रोल लाइन कहा जाता है। यदि दोनों रेखाएं रंगीन हैं, तो इसका अर्थ है सकारात्मक; केवल गुणवत्ता नियंत्रण रेखा रंगीन है, जिसका अर्थ है नकारात्मक; इन दो मामलों को छोड़कर, यह अमान्य परिणाम से संबंधित है।
