न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने का सिद्धांत

न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने का सिद्धांत

यह किट नए कोरोनावायरस (2019-nCoV) जीन पुनः संयोजक प्रतिजन के साथ पूर्व-लेपित है

प्लेट, और एक मार्कर के रूप में एंजाइम-लेबल मानव-विरोधी IgA मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के साथ, एलिसा अप्रत्यक्ष विधि का उपयोग करते हुए

मानव सीरम में नोवल कोरोनावायरस (2019-nCoV) IgA एंटीबॉडी का गुणात्मक रूप से पता लगाने के लिए।

प्रतिक्रिया परिसर को सब्सट्रेट टीएमबी में जोड़े जाने के बाद, प्रतिक्रिया को समाप्त कर दिया गया, और प्रत्येक कुएं के आयुध डिपो को 450 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा गया।

OD मान का आकार पता लगाए जाने वाले एंटीबॉडी की सामग्री के समानुपाती होता है।

नमूना आवश्यकताएं】

1. ताजा रक्त के नमूनों का प्रयोग करें। यदि आप उन्हें सहेजना चाहते हैं, तो आप उन्हें 2~8 डिग्री पर 48 घंटों के लिए रेफ्रिजरेट कर सकते हैं या उन्हें -20 डिग्री पर फ्रीज कर सकते हैं।

लाइव। बार-बार जमने और विगलन से बचें (3 बार से अधिक)।

2. घुलनशील, बादलयुक्त या वसायुक्त नमूनों के उपयोग से बचें।

3. यदि नमूने को ले जाने की आवश्यकता है, तो इसे 2 ~ 8 डिग्री या जमे हुए रखा जाना चाहिए।

4. नमूने में एंटीकोआगुलंट्स या सुरक्षात्मक एजेंट या संरक्षक जोड़ने से बचें, ताकि परीक्षण के परिणामों को प्रभावित न करें।

【निरीक्षण विधि】

1. किट को रेफ्रिजरेटर से बाहर निकालें और कमरे के तापमान (15 मिनट) में संतुलित करें, पूर्व-लेपित प्रतिक्रिया को हटा दें

बोर्डिंग और अनपैक किया जाना चाहिए। उपयोग के लिए आसुत या विआयनीकृत पानी के साथ केंद्रित धोने के घोल को 1:30 बजे पतला करें।

2. नमूना कमजोर पड़ना: नमूना मंदक 1:100 (नमूना 2uL --- नमूना के साथ परीक्षण किए जाने वाले नमूने को पतला करें

Diluent 200uL), अच्छी तरह से मिलाएं (या सीधे प्लेट में अच्छी तरह से पतला करें, यानी प्लेट में 200ul नमूना पतला डालें, 2ul नमूना जोड़ें और इसे मिलाएं)।

3. नमूना जोड़ें: पतला नमूना के 100uL प्लेट के कुएं में जोड़ें (यदि यह प्लेट के कुएं में पतला है, तो इस चरण की आवश्यकता नहीं है

कदम)। प्रत्येक कुएं में एक नकारात्मक और सकारात्मक नियंत्रण (100uL/well, undiluted) सेट करें, और एक रिक्त नियंत्रण कुएं सेट करें

(100uL नमूना मंदक डालें), हिलाएं और मिलाएँ।

4. ऊष्मायन: 37 डिग्री पर 30 मिनट। कुएं में तरल को हिलाएं, प्लेट को हर बार धोने के घोल से 3 बार धोएं

30 सेकंड के लिए रहने के बाद, छेद में तरल को हिलाएं, और अब्सॉर्बेंट पेपर पर थपथपाकर सुखाएं।

5. एंजाइम कंजुगेट डालें: 2 बूंद (या 100uL) प्रति कुएं, अच्छी तरह मिलाएं और 20 मिनट के लिए 37 डिग्री पर इनक्यूबेट करें। ऊपर से 3 बार धोकर सुखा लें।

6. रंग विकास: प्रत्येक कुएं में रंग डेवलपर ए और बी (या प्रत्येक 50uL) की एक बूंद डालें, हिलाएं और अच्छी तरह मिलाएं, 37 पर सेट करें

10 मिनट के लिए सेते हैं।